Klasifikacija koenzima koji su zbunjeni

Koenzimi, kofaktori i aktivatori
U skladu sa zahtjevima optimalnih uslova za enzimski katalizirane reakcije, u princip enzimske analize treba dodati određenu količinu pomoćnih faktora. Kofaktori se odnose na neproteinske komponente potrebne za aktivnost enzima, uključujući koenzime, kofaktore i aktivatore metalnih jona. Kofaktori blisko vezani za enzime nazivaju se kofaktori; Enzimski proteini bez kofaktora nazivaju se apozimi, koji nemaju katalitičku aktivnost i zahtijevaju dodavanje dovoljno kofaktora za formiranje holoenzima. Nakon inkubacije s kofaktorom tokom određenog vremenskog perioda, aktivnost enzima će se oporaviti. Stoga je često potrebno prethodno inkubirati kofaktor u uzorku i reagensu. Količina korištene pomoćne baze je često relativno mala.
Koenzimi, koji se slabo vežu za enzimske proteine ​​i mogu se lako odvojiti od enzima dijalizom i drugim metodama, nazivaju se koenzimi. Iako se koenzimi razlikuju od enzimskih supstrata, oni djeluju slično kao supstrati, vezujući se, razdvajajući i kružeći s enzimima tokom enzimskih reakcija. Određivanje doze koenzima može se obaviti tretiranjem njih kao supstrata. Na primjer, koenzimi u laktat dehidrogenazi se izračunavaju prema dvojnoj kinetičkoj jednadžbi supstrata.
Hemijska suština aktivatora je ion metala, koji može biti aktivni centar enzima ili aktivirati njegovu aktivnost putem drugih mehanizama. Kao aktivatori, joni metala imaju složeniji uticaj na kinetiku enzimskih reakcija. Najčešći su joni dvovalentnih metala kao što su Mg2+, Zn2+, Mn2+, Ca2+, Fe2+, itd. Većina jona teških metala su denaturirajući agensi za enzime. Metalni joni često pokazuju međusobni antagonizam ili inhibiciju. EDTA se često dodaje u sisteme za ispitivanje enzima kako bi se kelirali neki neesencijalni joni. Odgovarajuća koncentracija metalnih jona je neophodna, jer višak jona često inhibira brzinu enzimskih reakcija. Zbog činjenice da je kinetika aktivatora često drugačija od kinetike enzima, to može objasniti različite omjere uzoraka i reakcionih otopina, što rezultira nesrazmjernim rezultatima mjerenja aktivnosti enzima. Aktivacijski efekat N-acetilcisteina na kreatin kinazu je sličan. Doziranje aktivatora se općenito određuje kroz ponovljene eksperimente.